En quittant la Piazza Matteotti, tournez immédiatement à droite et suivez les indications pour le mont Subasio: en quittant la Porta Cappuccini, vous commencerez immédiatement la montée vers le sommet. Comme le départ est tout de suite très exigeant, nous vous recommandons de vous échauffer quelques minutes, peut-être en visitant le centre d'Assise, avant de commencer le parcours. Après 300 mètres, juste après la Porta Cappuccini, tournez à gauche et suivez le sentier n° 50 : la première partie de l'ascension est certainement la plus difficile et peut même vous obliger à poser le pied à terre en raison de la pente et des inégalités du terrain. L'ascension, constamment ombragée par une forêt dense, mène en un peu moins de 6 kilomètres à Gli Stazzi, presque au sommet du mont Subasio. Ici, quittez les bois et traversez la route goudronnée, en continuant sur le chemin de terre à mi-hauteur de la montagne.

À ce stade, la partie la plus difficile de l'itinéraire est déjà derrière vous et le chemin, qui passe juste en dessous du sommet du mont Subasio, vous récompensera de votre effort en vous offrant des vues absolument époustouflantes. Du kilomètre 8,5 au kilomètre 12,5, vous empruntez un sentier étroit avant de rejoindre le chemin de terre qui descend sur 5 kilomètres jusqu'à Collepino (km 17,4). Une fois de retour sur l'asphalte, tournez à droite et continuez à descendre à travers les oliveraies vers Spello, où un arrêt s'impose pour visiter le centre historique. 

Depuis Spello, continuez à droite et, à 22,7 km, tournez à droite sur la Via degli Ulivi et suivez-la jusqu'à Capodacqua (25,9 km). Quittez à nouveau la route goudronnée et commencez la deuxième partie la plus difficile du parcours, qui monte à travers les oliveraies jusqu'à 28,4 km. À partir de là, vous continuez à pédaler dans une succession de montées et de descentes le long de la route principale en terre battue jusqu'au km 30,3. À un carrefour, tournez à droite puis immédiatement à gauche dans la Via Borghettaccio. À 30,8 kilomètres, tournez à gauche et retrouvez la route goudronnée qui, en quelques kilomètres, vous ramène à la route principale (km 33) où, en tournant à droite, vous montez vers le centre d'Assise.

La beauté du paysage qui caractérise cet itinéraire, qui se développe en grande partie dans le parc régional du mont Subasio, vous récompensera de tous vos efforts. Le centre historique d'Assise, classé au patrimoine mondial de l'UNESCO, est une étape incontournable de cet itinéraire. Vous pourrez y visiter la basilique de Sainte Chiara, le couvent de Saint-Dominique et la splendide basilique de Saint-François. Juste à l'extérieur des murs, dominant la ville, se trouve la superbe forteresse Rocca Maggiore, reconstruite en 1367 par le cardinal Albornoz sur le site d'une structure précédente (1174) d'un ancien château féodal. Le centre de Spello mérite également une visite : bien que présentant des caractéristiques médiévales, cette ville a conservé de nombreux vestiges de l'époque où elle était une colonie romaine, comme le théâtre, l'amphithéâtre, les thermes et l'arc d'Auguste. Parmi les édifices religieux notables, citons l'église de Santa Maria Maggiore (12e-13e siècle), qui contient des trésors artistiques tels que des fresques de Pintoricchio et des peintures du Pérugin. À l'extérieur de Spello se trouve la Villa Fidelia (XVIe siècle), construite sur le site du temple de Vénus, du théâtre et des thermes, qui abrite une riche collection de peintures, de sculptures et d'antiquités.